采集程序:TESE 和 microTESE
本协议概述了睾丸精子抽取术(TESE)和显微外科解剖睾丸精子抽取术(microTESE)的采集过程,这些手术均由受过培训且在男性生殖手术方面经验丰富的外科医生实施。这些手术涉及从睾丸中提取精子,通常在医院手术室(OR)或门诊手术中心进行。手术前,必须确认所需材料和设备已准备就绪,包括精子洗涤介质、无菌容器和患者识别标签。本指南详细介绍了从标本采集到运输的每一个步骤,确保正确处理和加工以获得最佳结果。.
工具包内容 - 请在操作前确认内容
- 精子洗涤介质 - 一个 12 毫升的密封容器: 收到后放入冰箱。. 手术前至少在室温下放置半小时。.
- 两个 15 毫升锥形试管 用于左右睾丸的 TESE 标本
- 八种病人标签 - 四个贴有标签的左侧睾丸和四个贴有标签的右侧睾丸
- 让患者确认信息并在每个标签上首字母签名
- 在每个要放入标本的容器/锥形管上贴一个标签。请注意,一个容器/锥形管上的标签应为 "左",另一个容器/锥形管上的标签应为 "右"。.
- 两个无菌玻璃培养皿 用于切割睾丸组织。使用后,请手术室进行清洁、消毒,然后交还给您用于下一个病例。.
- 滑动支架
- 左右大体活检 - 2 张载玻片 - 10 个盖玻片
- 右侧 microTESE - 4 张幻灯片(预标记) - 仅 microTESE
- 左侧 microTESE - 4 张切片(预标记) - 仅 microTESE
- 八个 1 毫升低温瓶 白色小盒子中仅包含 microTESE
- 两个无菌尿液标本容器 作为碾碎睾丸组织的替代方法。如果不使用,请丢弃。.
- 一个样本袋 将装有标本和精子洗涤培养基的锥形管竖直放置,以便运输。将培养基和/或标本放入锥形管后,保持锥形管直立,以防标本泄漏。在将锥形试管运回纽约冷冻公司进行处理之前,应先用干净的手术室毛巾将试管包好,然后再放回运输箱中。.
- 第二个样本袋 在使用后放置洗净的玻璃培养皿
备件
- 无菌玻璃培养皿 - 随工具包提供
- 1 毫升一次性注射器 - 由手术室提供 - 每份送回实验室的标本使用一个(TESE 两个,microTESE 10 个)。
- 两个 15 毫升 Falcon 锥形管 - 随套件提供
- 患者识别标签--随套件提供
- 带盖玻片的无菌玻璃载玻片 - 随试剂盒提供
- 在 15 毫升锥形试管的盖子上缠上 Parafilm® 以防万一
设备:
- 操作显微镜
- 相差显微镜
- 370 锥形管和低温瓶的加热块(如有)
睾丸取精术(TESE)和显微外科解剖 睾丸取精术(microTESE) :
- 通过 microTESE 手术取精
- 手术可在医院手术室或非住院手术中心进行
- 手术当天,需要 10 毫升精子洗涤培养基瓶、无菌 15 毫升 Falcon 锥形管。.
- 实验室通常会在收到标本后,向患者征得 TESE 精子冷冻同意书。.
- 进入手术室后,向手术室工作人员索取医院印制的身份标签,并与医生和手术室工作人员确认患者身份。 该医院标签将贴在 microTESE 术中工作表上。.
-
术中精子鉴定
- 多个无菌小培养皿(‘DISH’),每个培养皿中放 500 ul 精子洗涤培养基 (SWM),用于 microTESE;每个培养皿中放 1000 ul(1 ml),用于 TESE。最好使用无菌玻璃培养皿,因为塑料培养皿在解剖过程中可能会从底面去除塑料屑。.
- 注:外科医生可能倾向于将睾丸的几个区域组合在一起,并将获得的标本放入一个 15 毫升的锥形管中。在这种情况下,应在培养皿中放入 1 毫升 SWM,在锥形管中放入 1 毫升 SWM(SWM 总体积为 2 毫升)。外科医生将确定每支锥形管中的标本取自何处(见第 2.3.2 节)。图 1 和图 2) 在记录纸和锥形管上。.
- 外科医生将把 1 个或多个 TESE/microTESE 标本放置在一个标本盘中,并指定标本取自的位置,以便在 microTESE 工作表(”LOG”)上按照以下规定的位置进行标注。 图 1 和图 2. 标本盘上也应标明位置。.
- 将标本剁成小块进行处理。理想情况下,处理后的标本应能通过 24 号 Angiocath(黄色);将标本的一小部分放在干净的载玻片上,盖上小方盖玻片(22×22 毫米),在手术室使用相差显微镜 400 倍下进行检查。载玻片上将标有与 LOG 表上样本相对应的编号,以及取自睾丸的位置缩写。 麻醉科医生/外科医生必须确保在制作玻片时,将样本中的少量组织转移到玻片上,以便观察。 在制作出满意的载玻片后,应立即使用 1 毫升注射器将剩余的组织样本注入贴有适当标签的锥形管中。应根据在手术室观察到的标本显微质量更新 LOG 表。
- 标本将按标本编号、睾丸位置、精子数量和精子活力(睾丸位置、精子数量和精子活力)在记录表上标明。图 1 和图 2).
- Andrologist/Surgeon 将根据术中发现决定何时结束 microTESE 手术。.
前往 Andrology 实验室的交通
- 所有标本应尽快运送到实验室。15 毫升锥形试管应牢牢封口,锥形试管的管口和管身上部用 Parafilm® 薄膜(随试剂盒附送)包裹,以提高安全性。锥形管应保持直立,以防组织和培养基泄漏,并放入标本袋中。标本在运输过程中应尽可能保持室温。可以用毛巾包裹标本,并将其放入有温度保护的箱子中,以便运送到实验室。.
图 1
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图 2
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如有任何疑问,请致电办公室(516-487-2700)或布鲁斯-吉尔伯特博士的手机(516-595-9475)。.